• lab-217043_1280

כיצד לנקות זיהום במפעל תאים

פעם התאים שאנו תרבית בהם

מפעל תאיםמזוהמים, רובם קשים לטיפול.אם התאים המזוהמים הם בעלי ערך וקשה להשיגם שוב, ניתן להשתמש בשיטות הבאות כדי להסיר אותם.

1. השתמש באנטיביוטיקה

אנטיביוטיקה יעילה יותר בהריגת חיידקיםמפעלי תאים.טיפול תרופתי משולב יעיל יותר מאשר טיפול תרופתי בלבד.טיפול תרופתי מונע יעיל יותר מתרופות לאחר זיהום.טיפול תרופתי מונע משתמש בדרך כלל באנטיביוטיקה כפולה (פניצילין 100u/mL בתוספת סטרפטומיצין 100μg/mL).לאחר זיהום, שיטת הניקוי צריכה להיות גדולה פי 5 עד 10 מהכמות הרגילה.יש להשתמש בתרופה במשך 24 עד 48 שעות לאחר ההוספה, ולאחר מכן להחליף אותה בשגרה הרגילה.נוזל תרבות.שיטה זו עשויה להיות יעילה בשלבים הראשונים של הזיהום.בנוסף לפניצילין וסטרפטומיצין, האנטיביוטיקה המשמשת יכולה לכלול גם גנטמיצין, קנאמיצין, פולימיקסין, טטרציקלין, ניסטטין וכו'. בשימוש נפוץ 400 עד 800 מיקרוגרם/מ"ל קנאמיצין או 200 מיקרוגרם/מ"ל טטרציקלין.המדיום משתנה כל 2 עד 3 ימים ומועבר למשך 1 עד 2 דורות לטיפול.בשנים האחרונות דווח כי 4-fluoro, 2-hydroxyquinoline (Ciprofloxacin, Cip), נגזרת Pleu-romutilin (נגזרת Pleu-romutilin, BM-Cyclin2: BM-1 ונגזרת טטרציקלין (BM-2)) יעיל בהרג מיקופלזמה בשימוש לבד או בשילוב.שלושת האנטיביוטיקה הללו מוכנות כולן לתמיסות מרוכזות פי 250 ב-PBS ומאוחסנות ב-20 מעלות צלזיוס לשימוש מאוחר יותר.ריכוז השימוש Cip הוא 10 מיקרוגרם/מ"ל, BM-1 הוא 10 מיקרוגרם/מ"ל, ו-BM-2 הוא 5מיקרוגרם/מ"ל.בעת השימוש, יש לשאוב תחילה את מצע התרבית המזוהם, להוסיף מצע תרבית RPMI1640 המכיל BM-1, ולאחר מכן לשאוב את מצע התרבות לאחר 3 ימים, להוסיף מצע תרבית RPMI1640 המכיל BM-2, ולהתרבות למשך 4 ימים, וכן הלאה למשך 3 ימים רצופים .סיבובים, עד שיוכח על ידי מיקרוסקופ צביעה פלואורסצנטי 33258 ש-mycoplasma חוסלה, אז מתווסף מדיום תרבית רגיל לתרבית ולמעבר 3-4 פעמים.

כיצד לנקות זיהום במפעל תאים1

2. טיפול בחימום

דגירה של תרבית רקמה מזוהמת ב-41 מעלות צלזיוס למשך 18 שעות יכולה להרוג את המיקופלזמה, אך יש לה השפעות שליליות על התאים.לכן, יש לערוך בדיקה מקדימה לפני הטיפול כדי לחקור את זמן החימום שיכול להרוג את המיקופלזמה במידה המרבית ולהשפיע לפחות על התאים.שיטה זו לפעמים לא אמינה.אם מטופלים תחילה בתרופות ולאחר מכן מחממים אותו ב-41 מעלות צלזיוס, ההשפעה תהיה טובה יותר.

3. השתמש בסרום ספציפי למיקופלזמה

ניתן להסיר זיהום מיקופלזמה עם 5% סרום חיסון של מיקופלזמה של ארנב (טיטר המוגלוטינציה 1:320 ומעלה).מכיוון שהנוגדן הספציפי יכול לעכב את הצמיחה של מיקופלזמה, הוא הופך לשלילי 11 ימים לאחר הטיפול באנטי-סרום ונשאר שלילי 5 חודשים לאחר מכן.הוא שלילי.עם זאת, שיטה זו מטרידה יותר ולא נוחה וחסכונית כמו שימוש באנטיביוטיקה.

4. שיטות אחרות

בנוסף לשיטות הנ"ל להסרת זיהום, קיימות גם שיטות חיסון ועיקור בבעלי חיים, שיטות פגוציטוזיס מקרופאגים, שיטות הוספת ברומורציל למזוהם.בקבוקי תרבותואחר כך מקרינים אותם באור, ושיטות סינון וכו', אבל כולם יותר מטרידים ולא יעילים.לכן, ברגע שמתרחש זיהום מיקופלזמה, אלא אם כן הוא בעל ערך חשוב במיוחד, הוא בדרך כלל מושלך ומתרבות מחדש.

אנא צור קשר עם Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


זמן פרסום: 24 באוקטובר 2023